Modèle expérimental préclinique "HUMAMICE"

Projet 2

Création d'un modèle préclinique de tumeur spontanée (HLA-A2/DR1/IAβ°/β2m°/HPV-E6) chez la souris humanisée pour les molécules HLA de classe I et II pour la recherche translationnelle en cancérologie ciblant ces molécules HPV-E6.

   Les modèles expérimentaux animaux actuels ne sont pas prédictifs des réponses humaines. En effet, nous savons que les réponses cellulaires humaines sont exclusivement restreintes aux complexes HLA alors que les réponses murines sont restreintes aux complexes CMH H-2. Ainsi, les déterminants antigéniques (les épitopes T) présentés par les complexes HLA sont différents de ceux présentés par les complexes CMH H-2. Cette différence peut rendre compte de notre échec en clinique humaine. Par ailleurs, la plupart des expérimentations se sont réalisées chez les souris saines - dans des situations optimales pour le développement de vaccins préventifs alors que la situation des malades porteurs de tumeurs malignes comme celle des patients d'une infection chronique sont très différentes. Où il y a une défaillance du système immunitaire à éliminer les cellules pathologiques. L'expérimentation chez des souris saines ne reflète pas l'état physiologique réel de nos patients et qui ne sont adopté pour le développement de l'immunothérapie thérapeutique ou vaccin curatifs efficaces, qui devraient être capable d'inverser de cette statut immunitaire.

   Dans ce projet, nous nous efforçons d'améliorer les modèles d'expérimentation animale actuels dans le but d'atteindre les 2 objectifs majeurs cités ci-dessus. A savoir, une souris « humanisée » qui possède un système immunitaire fonctionnel de spécificité humaine (c'est à dire restreints aux complexes HLA) et capable de prédire fidèlement les réponses humaines. Par ailleurs, ces souris développent spontanément des tumeurs cancéreuses, simulant la situation physiologique réelle du patient cancéreux. Ce modèle permettra aux chercheurs d'expérimenter des protocoles pour sélectionner les thérapies efficaces

   Le présent projet consiste à créer ce nouveau modèle expérimental de souris humanisée et qui développe spontanément de tumeurs cancéreuses HPV-E6+. Il s'agit de la souris « HLA-A2+/+DR1+ /+/IAβ°β2m°/HPV-E6+/+ ».

projet 3

Création des souris HLA-A2/DR1/IAβ°/β2m°/FoxP3-GFP comme un modèle d'expérimentation pré clique associé aux techniques d'imagerie

       Nous avons obtenus des souris HLA-A2/DR1/IAβ°/β2m°. Ces souris humanisées HLA transgéniques récapitulent avec précision les réponses immunitaires humaines (réponses HLA restreint). Nous savons que les lymphocytes T régulatrice (CD4+Fox-P3+) jouent un rôle essentiel dans la mobilisation des lymphocytes B productrice d'anticorps protectrices et/ou dans l'activation optimale des lymphocytes T cytotoxique dans l'élimination des cellules anormales.

      Dans ce projet de création de souris HLA-A2/DR1/IAβ°/β2m°/FoxP3-GFP, nous voulons rendre les lymphocytes T régulatrices CD4+ de ces souris auto-fluorescentes en exprimant la protéine Green Fluorescent Protéine (GFP). En l'associant aux progrès techniques en imagerie, il nous permettra de mieux étudier les mécanismes cellulaires et moléculaires impliqués in vivo de l'immunité protecteur. Elle favorise l'application en conformité avec les exigences de remplacement, de réduction et de raffinement, en permettant un cinétique de suivi immunologique non invasif chez ces souris.