Microscope confocal LEICA SP5
(acquisition novembre 2010)
Cet appareil, entièrement motorisé et équipé avec un statif inversé, une platine motorisée et une chambre thermostatée, est destiné à l'imagerie confocale 2, 3, 4D (3D+ temps). Sa très large gamme de raies LASERS adaptées à la biologie et ses détecteurs spectraux permettent une imagerie spectrale fine pour la séparation de fluorochromes de spectres proches et une observation jusqu'à 4 fluorochromes simultanés. Ce poste est adapté pour l'observation d'échantillons vivants.
Manuel d’utilisation du microscope confocal Leica TCS SP5 de l'IAL (Philippe Leclerc, Maj 04-2016)
Configuration
| Microscope | Microscope inversé Leica DMI 6000B |
| Objectifs | 10x, 40x et 63x (à immersion huile) |
| Lasers |
- laser diode, raie d'excitation à 405 nm Toutes les sources lasers sont sous contrôle d'un AOTF. |
| Excitation | Système AOBS (Aucun filtre d'excitation) avec une haute transmission sur tout le spectre visible. |
| Détecteurs | 4 photomultiplicateurs et Détecteur de lumière transmise permettant de faire, lors d'une acquisition confocale, une image en lumière transmise (BF), en contraste interférentiel (DIC) ou en contraste de phase (PH). |
| Système de scan | Scanner conventionnel point par point (TCS), conduit par un galvanomètre et à position contrôlée. Dédié aux applications à vitesses variables, aux mesures nécessitant une très haute résolution de scan et l'arrêt du faisceau laser en un point. Fréquence maximale par ligne : 2800 Hz |
| Déplacement en Z | Surplatine SuperZ Galvo |
| Enceinte thermostatée | Une enceinte thermostatée avec régulation du CO2 permet l'utilisation de ce microscope confocal pour l'observation d'échantillons vivants |
| Logiciel d'acquisition | Leica Software LASAF |
| Acquisition d'images | Système adapté pour les techniques de corrélations d'images, de mesures FRET et FRAP |
Vidéomicroscopie
Le vidéomicroscope est équipé :
- d'un statif inversé Zeiss équipé d'une chambre thermostatée et régulée en CO2
- d'une platine motorisée XY
- d'un piezo électrique Z
- couplé à un système d'épifluorescence (dapi, 488, 546)
- d'une caméra Coolsnap HQ (Roper Scientific)
- du logiciel d'acquisition Metamorph (Roper Scientific)